ELISA实验酶标板整体背景高，造成该现象的原因有4个：
1、抗体非特异性结合。——应确保进行了封闭并且使用的是恰当的封闭液，zui好使用5%~10%的与二抗同种动物来源的血清或牛血清，确保板孔经过预处理以防止非特异结合，使用亲和力强、纯度高的抗体，zui好经过了预吸收处理；
2、底物结合浓度过高或反应时间过长。——应调整底物的浓度，当酶标板显色足够进行吸光度读数时立即使用终止液终止反应；
3、底物溶液不新鲜或被污染。——应检测底物溶液，正常的底物溶液应该是清亮透明的，如果变黄或其他颜色则是被污染的标志；
4、底物孵育过程没有避光。——底物孵育应该在避光环境下进行。