细胞特性
产品名称
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小鼠精母细胞;GC2 spg
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英文名称
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GC-2 spg
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分类
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小鼠细胞系
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货号
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XG-X9481
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组织来源
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小鼠精母细胞; SV40大T抗原转染
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形态
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上皮细胞样
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种属来源;小鼠
组织来源;小鼠精母细胞; SV40大T抗原转染
生长特性;贴壁生长
细胞形态;上皮细胞样
背景介绍;该细胞系来源于一6周龄的雄性BALB/c小鼠 新鲜分离的精母细胞通过共转染SV40大T抗原基因 (Psv3neo) 和温度敏感的p53抑癌基因突变 (LTRp53cG9),建立获得GC-spd(ts) 细胞株。该细胞经G418筛选,培养6个月并经有限稀释法形成单细胞克隆三次。目前,该细胞已丧失其分化潜能,处于减数分裂前期。细胞含有乳多空病毒(papovavirus)
细胞代数;10代以内
细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测;无
培养基;DMEM+10%FBS+1%P/S
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件;无血清冻存液,液氮储存
运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理

1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)elisa检测试剂盒
人蛋白酶3(PR3)elisa分析检测试剂盒
细胞磷酸甲羟戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)活性
小鼠维生素B9(VB9)elisa检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa检测试剂盒
小鼠P物质受体(SP-R)elisa检测试剂盒
防脱载玻片经APES处理 50片
细胞NF KAPPA B P65蛋白表达比色法定量检测试剂盒
马白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒
味觉2型受体蛋白家族49抗体 TAS2R49
细胞骨架衔接蛋白BIN3抗体 BIN3
src原癌基因单克隆抗体 SRC
TRIM43B蛋白抗体 TRIM43B
AF680标记的上皮细胞粘附分子(CD326)抗体 EpCAM,
Alexa Fluor 680 conjugated
AF750标记的造血干细胞抗原CD133抗体 CD133, Alexa
Fluor 750 conjugated
紧密连接蛋白2单克隆抗体 Claudin 2
卷曲螺旋结构域蛋白126抗体 CCDC126
原钙粘蛋白γA1抗体 PCDHGA1
粘蛋白20抗体 MUC20
分泌型磷脂酶A2亚基5抗体 Secretory phospholipase A2 Type V
富含脯氨酸蛋白18抗体 PRR18
小鼠精母细胞;GC2 spgG蛋白偶联受体γ4抗体 G gamma4
HRP标记的人CD34单克隆抗体 CD34, HRP
conjugated
凝血酶原酶/维介素抗体 FGL2
羟乙基淀粉抗体 Hydroxyethyk starch
大鼠促黄体 (LH)elisa检测试剂盒
小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa分析检测试剂盒
绵羊甲状腺素(T4)elisa分析检测试剂盒
脑瘤相关基因抗体
Netrin G2 Ligand
生长分化因子7抗体
GDF7
操作步骤:

步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存

方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。