操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
种属来源；人
组织来源；皮肤
生长特性；贴壁生长
细胞形态；成纤维样细胞
背景简介；皮肤指身体表面包在肌肉外面的组织，是人体大的器官，主要承担着保**体、排汗、感觉冷热和压力等功能。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养，它们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言，成纤维细胞能够分泌 I 型和 III 型胶原等细胞外基质，并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时，真皮成纤维细胞由可增殖，可迁移的表型变为有收缩性的，可重塑基质的表型，同时，它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。该细胞通过慢病毒转染的方式携带 SV40 基因。
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
培养基；HDF-SV40T细胞完全培养基
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
人水通道蛋白-2（AQP2）elisa检测试剂盒
胰岛素基因增强结合蛋白2抗体
Islet 2
DNA修复酶相互作用蛋白抗体
APLF
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）elisa检测试剂盒
超敏C反应蛋白Hs-CRP试剂盒 R1：40ml×1 R2：10ml×1 胶乳增强
冰冻切片组织线粒体复合物I蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
牛胰岛素(Insulin)elisa分析检测试剂盒
CTR1抗体
MT
21号染色体开放阅读框87抗体
C21orf87
肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体 Anti-TRIP
Rho GTP酶激活蛋白29抗体 Anti-Rho GTPase activating protein 29
核因子κB抑制蛋白β抗体 Anti-IKB beta
原基因18家族STMN3蛋白抗体 Anti-STMN3
人皮肤成纤维细胞（国内建系永生化处理）；HDF-SV40T乙型肝炎病毒X蛋白上调基因11抗体
VWCE
DENND1C蛋白抗体
DENND1C
蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体 Anti-SHP-2/PTPN11
核抑制蛋白磷酸酶1抗体 Anti-NIPP1/ARD1
视黄醛脱氢酶2型抗体 Anti-RALDH2
TBR1蛋白抗体 Anti-TBR1
大鼠封闭蛋白4(CLDN4)elisa分析检测试剂盒
CLDN4 ELISA Kit
豚鼠白介素13(IL-13)elisa分析检测试剂盒
鹅钙结合蛋白(CR)elisa生化检测试剂盒
CR ELISA Kit
人单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗体(IgG)elisa生化检测试剂盒
HumanherpessimplexvirusⅠ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)antibody(IgG)ELISAkit