操作步骤:

步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存

方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
细胞特性
产品名称
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SCC-15细胞
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英文名称
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SCC15
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分类
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人细胞系
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货号
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XG-X7061
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组织来源
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舌癌
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形态
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上皮细胞样
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细胞别称;SCC15细胞, 人舌鳞癌细胞
种属来源;人
组织来源;舌癌
生长特性;贴壁生长
细胞形态;上皮细胞样
背景简介;人鳞状细胞癌是一种恶性皮肤肿瘤,其特征是鳞状细胞发生恶性转化并形成肿瘤。SCC-15是其中一种具有特定生物学特性的细胞系,可以从患者身上获得并用于研究目的。 人鳞状细胞癌SCC-15细胞系具有一些与其他鳞状细胞癌细胞系相似的生物学特性,如细胞角蛋白表达、细胞间连接和细胞殖等。这些细胞系通常用于研究鳞状细胞癌的发生、发展和等,以及评估新药和方案的疗效和性。
需要注意的是,人鳞状细胞癌SCC-15细胞系是一种肿瘤细胞系,具有高度异质性,不同的细胞系可能会表现出不同的生物学特性。因此,在研究中应该注意选用符合要求且规范的SCC-15细胞系,并在使用前对其生物学特性进行评估和确认。
细胞代数;10代以内
细胞规格;1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测;无
培养基;DMEM+10% FBS+PS
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件;无血清冻存液,液氮储存
运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理

1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
TAT检测试剂盒
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析检测试剂盒
BMG/β2-MG ELISA Kit
人核糖核酸抑止剂(RNH1/PRI/RNH)elisa分析检测试剂盒
RNH1/PRI/RNH检测试剂盒
小鼠前列腺素E1(PGE1)elisa分析检测试剂盒
大鼠Na-K-ATP酶(Na-K-ATPase)elisa检测试剂盒
冰冻切片半胱-3(CASPASE-3)活性原位荧光染色检测试剂盒
人COP9 结构光形态发生源物亚基2(拟南芥)(COPS2)elisa检测试剂盒免费代测
鸭子催乳素(PRL/LTH)elisa分析检测试剂盒
PRL/LTH ELISA Kit
人板层素相关多肽2亚型α(TMPO)elisa分析检测试剂盒
HumanTMPO检测试剂盒
非蛋白封阻缓冲液
人DAB2互作蛋白(DAB2IP)elisa分析检测试剂盒
大鼠NAD(P)H脱氢酶(醌)1(NQO1)elisa检测试剂盒
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)elisa检测试剂盒
SCC-15细胞NOTO蛋白抗体
NOTO
9号染色体开放阅读框163抗体
C9orf163
睾丸特异丝氨酸/苏氨酸激酶6抗体 Anti-TSSK6/CT72
磷脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 Anti-PI3 Kinase p110 delta
磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体 Anti-phospho-PI3KCA(Tyr317)
肌蛋白结合蛋白γ2抗体 Anti-SNTG2/Syntrophin 5
PE-Cy5.5标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体
Mouse Anti-Human IgG
H&L (3D3) mAb / PE-Cy5.5
猪水肿病-志贺样Ⅱ型变异体A抗体
白细胞介素37抗体
IL-37
1号染色体开放阅读框222抗体
C1orf222