细胞特性
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产品名称
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RPMI2650
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英文名称
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RPMI2650
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分类
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人细胞系
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货号
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XG-X9237
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组织来源
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鼻中隔；来源于转移部位的鳞状细胞癌:胸腔积液
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形态
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上皮细胞样,细胞非常小,成簇生长,融合形成厚层
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种属来源；人
组织来源；鼻中隔；来源于转移部位的鳞状细胞癌:胸腔积液
生长特性；贴壁生长
细胞形态；上皮细胞样,细胞非常小,成簇生长,融合形成厚层
细胞代数；10代以内
背景简介；来自胸腔积液的一种广泛的鼻中隔恶性肿瘤，诊断为间变性鳞状细胞癌。几乎正常的核型，稳定的染色体数目和可能来源于恶性细胞使细胞系独特的长久人类细胞系。细胞非常小，成簇生长，融合形成厚层。
保藏机构；ATCC; CCL-30
细胞规格；1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测；无
培养基；MEM+10%PBS+1%PS
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
大鼠表面活性物质关联蛋白C(SPC)elisa检测试剂盒
组织赖（lysine）含量荧光定量检测试剂盒
小鼠白介素17(IL-17)elisa检测试剂盒
大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)elisa检测试剂盒
细胞线粒体复合物IV蛋白表达比色法定量检测试剂盒
植物甘露糖比色法定量检测试剂盒
人胃泌素（GAS）elisa检测试剂盒
大鼠金属转运蛋白1(MTP1)elisa分析检测试剂盒
猪双氢睾酮(DHT)elisa检测试剂盒
磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体 Phospho-CEBP alpha (Thr222 + Thr226)
硫酸软骨素酶2抗体 CHSS2
EMR4蛋白抗体 EMR4
FAM194A蛋白抗体 FAM194A
锌指蛋白909抗体 ZBTB1
胸腺素β10抗体 T
Beta 10
促黄体诱导蛋白5抗体 STARD5
蛋氨酸氨肽酶1D抗体 MAP1D
RPMI2650丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶DCAMKL1抗体 DCAMKL1
丝裂原活化蛋白激酶相关蛋白1抗体 MAPKAP1/SIN1
Pescadillo抗体 Pescadillo
PE标记小鼠CD94单克隆抗体 mouse CD94/PE
14-3-3 sigma抗体 14-3-3 sigma
1号染色体开放阅读框25抗体 C1orf25
环指蛋白19抗体 DORFIN
病毒受体抗体 CD155
全血线粒体DNA萃取试剂盒
大鼠肾上腺素能受体α2C(ADRα2C)elisa检测试剂盒
线虫基因组DNA分离试剂盒
MCART2蛋白抗体
MCART2
19号染色体开放阅读框45抗体
C19orf45
操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。