操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
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英文名称
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DLD-1:DLD1
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货号
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XG-X3286
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分类
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人细胞系
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种属
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人
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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上皮细胞样
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组织来源
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结直肠腺癌上皮细胞
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用途
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仅供科研研究实验
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生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认）
生长培养基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件:
气相：空气，95%；CO2，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 DLD-1细胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNA指纹鉴定和染色体组型分析表明DLD-1细胞与HCT-15细胞相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。DLD-1细胞和HCT-15细胞的遗传起源可通过DNA指纹鉴定证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。DLD-1细胞的CSAp阴性(CSAp-)，p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C→T点突变导致241位的Ser→Phe)。DLD-1细胞角蛋白过氧化物酶染色阳性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测。DLD-1细胞表达肿瘤特异性核基质蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1细胞代数不明且污染了支原体，其后经过12周多种联合培养处理，处理之后每周用Hoechst染色和标准培养法检测。其后连续11个月不加培养，DLD-1细胞所有的检测呈阴性。
年龄（性别） 男性；
组织来源 结直肠腺癌上皮细胞
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肠癌细胞
生物等级 BSL-1
倍增时间 ~24-48 hours
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors
developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated
subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表达情况 Blood Type O.The cells are
weakly positive for keratins and vimentin.The cells are positive for keratin by
immunoperoxidase staining.DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression
(the p53 antigen produced has a C -> T
基因表达情况 carcinoembryonic antigen
(CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.
保藏机构 ATCC; CCL-221 BCRC; 60132
DSMZ; ACC-278 ECACC; 90102540
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
苏丹红elisa分析检测试剂盒
Sudan red ELISA kit
人白介素25(IL-25)elisa分析检测试剂盒
IL-25ELISAkit
空调清洁剂
小鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)elisa检测试剂盒
鸽子白蛋白(Albumin)elisa分析检测试剂盒
植物结构域重排甲基转移酶（Domain Rearranged
Methylase；DRM）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒
ORC5L蛋白抗体
ORC5L
卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体
HDHD1A
金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体（N端） Anti-TIMP-1(NT)
血小板源性生长因子受体A抗体(PDGFRα) Anti-PDGFRA
磷酸化酶β抗体 Anti-PHKB
溶质载体家族蛋白22成员5抗体 Anti-Slc22a5
Cy5.5标记的小鼠抗人IgM
DLD-1人结直肠腺癌细胞Mouse
Anti-Human IgM / Cy5.5
FBXL16蛋白抗体
FBXL16
人C4结合蛋白(C4BP)elisa分析检测试剂盒
HumanC4BPELISAKit
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa分析检测试剂盒
PL-A2ELISAKit
大鼠P物质(SP)elisa分析检测试剂盒
Rat Substance P ELISA
Kit
人骨涎蛋白(BSP)elisa分析检测试剂盒
BSPELISAKit
HMGCLL1蛋白抗体
HMGCLL1
锚蛋白重复结构域蛋白40抗体
ANKRD40