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‌蛋白浓度酪安酸差色光谱法测定过程

‌蛋白浓度‌是指在一定体积或单位质量的样品中,蛋白质所占的体积或质量比例‌。

酪安酸差色光谱法:

1.  打开分光光度剂,预热30分钟,是紫外灯处于稳定发光状态

2.  2容积为1mlde 微量石英比色杯中分别加入900ulPH7.4,PH12.00.1mol/l磷酸缓冲液,把盛有PH12.0缓冲液的比色杯放入样品杯中放入支架上,把盛有PH7.4缓冲液的比色杯放入到参比杯的支架上,然后准确的测出295nm波长下的光吸收值,或用250350nm扫描

3.  在上述的2个比色杯中分别加入100UL的待测样品液,小心振荡混匀

4.  重复2操作

5.  计算蛋白浓度:﹝(PH12.0A295-PH7.4A295)/2.330×N﹞×W

N是蛋白分子中酪安酸毫摩尔消光系数之差

W是样品稀释倍数

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